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PCR實(shí)驗(yàn)室凈化

“PCR實(shí)驗(yàn)室是否需要做潔凈”這個(gè)疑問困惑了很多從業(yè)人員,下面我們從PCR實(shí)驗(yàn)室作業(yè)原理、規(guī)劃制作、運(yùn)轉(zhuǎn)管理等方面全面了解PCR。
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“PCR實(shí)驗(yàn)室是否需要做潔凈”這個(gè)疑問困惑了很多從業(yè)人員,下面我們從PCR實(shí)驗(yàn)室作業(yè)原理、規(guī)劃制作、運(yùn)轉(zhuǎn)管理等方面全面了解PCR。PCR實(shí)驗(yàn)室(即:基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室)是人為進(jìn)行的DNA片段生物體外復(fù)制,在醫(yī)療、刑偵、食品安全、生命科學(xué)等范疇?wèi)?yīng)用越來越廣泛。運(yùn)轉(zhuǎn)過程中為了避免穿插污染,其規(guī)劃制作與運(yùn)轉(zhuǎn)管理主要要求為:

1、實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃制作、安全作業(yè)制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序,應(yīng)契合現(xiàn)行《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》GB19489的要求。

2、PCR依據(jù)作業(yè)步驟劃分為四個(gè)功用區(qū)域,即試劑貯存和預(yù)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、 擴(kuò)增產(chǎn)品剖析區(qū),如果具有實(shí)時(shí)熒光PCR儀,擴(kuò)增與產(chǎn)品剖析區(qū)可以兼并。各功用區(qū)域有必要有清晰的標(biāo)記,不同功用區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品不得混用。

PCR實(shí)驗(yàn)室的空氣流向可依照試劑貯存和預(yù)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)品剖析區(qū)進(jìn)行,避免擴(kuò)增產(chǎn)品順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域??梢勒諒脑噭┵A存和預(yù)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)品剖析區(qū)方向空氣壓力遞減的方法進(jìn)行??赏ㄟ^安裝排風(fēng)扇、負(fù)壓排風(fēng)設(shè)備或其他可行的方法完成。

3、進(jìn)入各作業(yè)區(qū)域應(yīng)當(dāng)嚴(yán)厲依照單一方向進(jìn)行,即試劑貯存和預(yù)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→ 擴(kuò)增產(chǎn)品剖析區(qū)不同的作業(yè)區(qū)域運(yùn)用不同的作業(yè)服(例如不同的色彩)。作業(yè)人員離開各作業(yè)區(qū)域時(shí),不得將作業(yè)服帶出。

4、實(shí)驗(yàn)室的清潔應(yīng)當(dāng)按試劑貯存和預(yù)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)品剖析區(qū)的方向進(jìn)行。不同的試驗(yàn)區(qū)域應(yīng)當(dāng)有其各自的清潔用具以避免穿插污染。

5、作業(yè)完畢后,有必要立即對(duì)作業(yè)區(qū)進(jìn)行清潔。作業(yè)區(qū)的試驗(yàn)臺(tái)外表應(yīng)當(dāng)可耐受比如次氯酸鈉的化學(xué)物質(zhì)的消毒清潔作用。試驗(yàn)臺(tái)外表的紫外照耀應(yīng)當(dāng)便利有用。因?yàn)樽贤庹找木嚯x和能量對(duì)去污染的作用非常要害,因而可運(yùn)用可移動(dòng)紫外燈(254nm波長(zhǎng)),在作業(yè)完成后調(diào)至試驗(yàn)臺(tái)上60~90cm內(nèi)照耀。因?yàn)閿U(kuò)增產(chǎn)品僅幾百或幾十堿基對(duì)(bp),對(duì)紫外線損傷不敏感,因而紫外照耀擴(kuò)增片段有必要延伸照耀時(shí)間,是照耀過夜。

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